蛋白质组学技术专家
毕赤酵母真核表达系统
简介

    

酵母表达系统作为一种后起的外源蛋白表达系统,由于兼具原核以及真核表达系统的优点,正在基因工程领域中得到日益广泛的应用,应用此系统可高水平表达蛋白,且具有翻译后修饰功能,故被认可为一种表达大规模蛋白的强有力的工具。
常用的酵母表达系统:
一、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)表达系统:
酿酒酵母(Saecharomycescerevisiae)在酿酒业和面包业的使用已有数千年的历史,被认为是GRAS(generally recognized as safe)生物,不产生毒素,已被美国FDA确认为安全性生物,但酿酒酵母难于高密度培养,分泌效率低,几乎不分泌分子量大于30 kD的外源蛋白质,也不能使所表达的外源蛋白质正确糖基化,而且表达蛋白质的C端往往被截短。因此,一般不用酿酒酵母做重组蛋白质表达的宿主
二、甲醇营养型酵母表达系统:
甲醇酵母表达系统是应用最广泛的酵母表达系统。甲醇酵母主要有汉森酵母属(Hansenula),毕赤酵母属(Pichia),球拟酵母属(Torulopsis)等,并以毕赤酵母属(Pichia)应用最多。

甲醇酵母的表达载体为整合型质粒,载体中含有与酵母染色体中同源的序列,因而比较容易整合入酵母染色体中,大部分甲醇酵母的表达载体中都含有甲醇酵母醇氧化酶基因—1(AOX1),在该基因的启动子(PAOX1)作用下,外源基因得以表达。甲醇酵母一般先在含甘油的培养基中生长。培养至高浓度。再以甲醇为碳源。诱导表达外源蛋白。这样可以大大提高表达产量。利用甲醇酵母表达外源性蛋白质其产量往往可达克级。与酿酒酵母相比其翻译后的加工更接近哺乳动物细胞,不会发生超糖基化

酵母表达的特点酵母是一种单细胞低等真核生物,培养条件普通,生长繁殖速度迅速,能够耐受较高的流体静压,用于表达基因工程产品时,可以大规模生产,有效降低了生产成本。


普罗金公司建有专门的重组蛋白表达纯化实验室,可提供从基因合成、质粒构建、蛋白表达、蛋白纯化等一站式重组蛋白表达纯化相关技术服务,近年成功完成相关重组蛋白表达纯化项目上千例。


表达策略及流程


毕赤酵母真核表达纯化策略及流程20210715.jpg


项目明细列表


大肠杆菌原核表达项目明细列表20210715.jpg




部分案例图片


大肠杆菌原核表达部分案例20210715.jpg

部分仪器设备


大肠杆菌原核表达纯化仪器20210715.jpg

部分合作客户


大肠杆菌原核表达部分客户20210715.jpg


联系我们

service@proteingene.com

027-87003451
湖北省武汉市东湖高新区高新大道666号光谷生物城创新园武汉生物技术研究院B7栋               邮编:430075
在线客服
在线客服